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      • 產品名稱:
      • 轉基因 Cry2A 試劑盒
      • 產品型號:
      • Cry2A
      • 產品簡介:
      • 轉基因 Cry2A 試劑盒系用特異性抗 Cry2A 單抗包被的微孔板和酶標記抗 Cry2A 單抗,雙抗體夾心法檢測 Cry2A 基因表達產物,可以高靈敏度和特異性的檢測轉基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。
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      產品名稱:轉基因 Cry2A 試劑盒


       

      【原理】
      本品系用特異性抗 Cry2A 單抗包被的微孔板和酶標記抗 Cry2A 單抗,雙抗體夾心法檢測 Cry2A 基因表達產物,可以高靈敏度和特異性的檢測轉基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。


      【試劑盒組份(規格)】
      預包被板(抗 Cry2A 單抗)      12 孔×8
      Cry2A 酶標抗體                 12 ml×1 瓶
      20×濃縮洗滌液                      30 ml×1 瓶
      5×抽提液/稀釋緩沖液                30 ml×1 瓶
      底物液 A                            7 ml×1 瓶
      底物液 B                            7 ml×1 瓶
      終止液                              7 ml×1 瓶
      使用說明書                          1 份
      0ppb 陰性對照                       1ml
      3 個不同濃度的標樣:
      1 ppb, 5 ppb,10 ppb            各 1ml


      【試劑準備】
      試劑盒中的 20×濃縮洗滌液 30 ml 加 570 ml 滅菌 ddH2O 溶解稀釋至 1×洗滌液,
      5×抽提液(30 ml)加 120 ml ddH2O 稀釋至 1×抽提液,4 ℃存放備用。


      【樣品準備】
      稱取約 20 mg 葉片,加 0.5 ml 1×抽提液(使用前 30 min 放置室溫)研磨至勻漿,室溫放置 30 min,測定前把樣品上清液稀釋 5-20 倍。
      測定莖干和胚乳中的 Bt 蛋白時,樣品稱取約 40 mg,加 1ml 1×抽提液研磨。


      【ELISA 反應】
      1. 依次加 100 μl 陰性對照,標準品(3 個不同濃度的標樣: 1 ppb, 5 ppb,10ppb)和待測樣品至 96 孔板;
      2. 用封口膜蓋住 96 孔板,快速搖動平板混勻樣品;
      3. 37 ℃恒溫箱孵育 30 min;
      4. 倒掉 96 孔板中液體,用 1×洗滌液每孔 250 μl 洗滌微孔板,漂洗 5 次,用吸水紙拍干;
      5. 按順序在每個小孔中加入 100 μl Cry2A-酶標抗體,然后重復步驟 2;
      6. 37 ℃恒溫箱孵育 30 min;
      7. 倒掉 96 孔板中液體,用 1×洗滌液每孔 250 μl 洗滌微孔板,漂洗 5 次,用吸水紙拍干;
      8. 依次加入 50 μl 底物 A 液,50 μl 底物 B 液,重復步驟 2;
      9. 37℃恒溫箱孵育 10 min,加 50μl 終止液,充分混勻終止反應,15 min 以內在酶標儀上讀取結果。在 450 nm 為主波長,630 nm 為次波長(或單波長 450 nm)下,用空白孔校零,再讀取各孔 OD 值。


      【注意事項】
      1. 測定中需使用的所有試劑和 96 孔板提前 30 min 放置室溫溫育(否則會影響試驗準確性),注意 12 連管必須溫育后再從平板上取下,未使用完的預包被板條應置于有干燥劑的封口袋中密封保存;
      2. 試劑使用前應充分搖勻;
      3. 搖動平板混勻時注意避免樣品之間交叉污染;
      4. 使用洗滌液漂洗時,洗滌液需要填滿每個小孔,進行充分漂洗;
      5. 研磨好的樣品如果不能一次全部測量,可以暫時在 4 ℃避光保存,但是最好在 24 h 內測定;
      6. 結果判讀請在反應終止后 15 min 內完成。


      【Bt 蛋白濃度計算公式】

      【儲存條件及有效期】
      試劑盒儲存于 2-8℃,切勿凍存;未開封試劑盒有效期 12 個月,開封后 3 個月內用完。(見包裝盒上標簽有效期)

       

      【技術參數】
      本品適用于玉米、棉花、大豆以及其各種農作物中轉基因成分的快速定性測試。

       

      【產品編號】
      規格:96孔
      檢測樣本:種子/葉片
      檢測時間:約2小時
      有效期:12個月
      儲存條件:2℃~8℃避光保存,切勿冷凍

      關鍵字:種子儀器,育種設備,種子檢驗,種子檢測 網址:http://www.wjks1017.com 備案號:浙ICP備09083614號-45
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